
耗材常說的無熱原、無核酶、無內(nèi)毒素究竟是什么意思
不知道大家平時有沒有經(jīng)常采購耗材的需求,如果是經(jīng)常采購實驗室耗材的人可能會發(fā)現(xiàn),各個廠家可能都會給產(chǎn)品標榜上無酶無熱原、無內(nèi)毒素的標簽,
特別是涉及到一些細胞生物學和分析生物學的耗材更是如此,例如常見的15ml和50ml離心管、細胞培養(yǎng)瓶、細胞培養(yǎng)皿、細胞培養(yǎng)板、凍存管、PCR板等
等產(chǎn)品。而有這些描述的產(chǎn)品通常可能也會比普通的同類產(chǎn)品貴一些。那么這些說法到底是什么意思,又對我們的實驗有什么影響呢?我們
平時在進行采購的時候應(yīng)該如何進行選擇,這里就給大家簡單介紹下。
定義
1
熱原
熱原指注入機體后能引起人體體溫異常升高的致熱物質(zhì)。廣義的熱原包括細菌性熱原、內(nèi)源性高分子熱原、內(nèi)源性低分子熱原及化學熱原等。這里所指的
“熱原”,主要是指細菌性熱原,是某些微生物的代謝產(chǎn)物、細菌尸體及內(nèi)毒素。
2
酶
酶大家在初中就學過,作為一種生物催化劑,酶能夠高效催化我們生物體內(nèi)各種生化反應(yīng)的進行。然而大部分產(chǎn)品所說的無酶,實際上更準確點說并不是指
所有酶,而是指核酸酶,很多廠家也寫成DNase-free和RNase-free,都是代表的一個意思。核酸酶能夠分解核酸分子,有專一性降解DNA或RNA,也有專
一性較低可同時作用于DNA和RNA分子的酶。
3
內(nèi)毒素
內(nèi)毒素為革蘭氏陰性菌的菌體中存在的毒性物質(zhì)的總稱。是多種革蘭氏陰性菌的細胞壁成分,由菌體裂解后釋出的毒素,成分為脂多糖。一般認為內(nèi)毒素為熱
原的一種,藥品生產(chǎn)的時候通??梢越邮埽翰淮嬖趦?nèi)毒素則不存在熱原,因此在生產(chǎn)的時候可能只進行內(nèi)毒素檢測而不進行熱原檢測。
影響
熱原和內(nèi)毒素能夠刺激機體,引起機體發(fā)熱。在制藥、臨床等領(lǐng)域,為了人的安全,通常對熱原和內(nèi)毒素的量有所要求。在中國藥典中對于熱原和內(nèi)毒素的檢
測也都給到了明確的方法。而核酸酶在涉及到分子學實驗室的時候,因為其具有分解DNA的作用,很可能使目標分子片段被降解,例如PCR實驗中,如果收到
核酸酶的污染有可能無CT值,從而產(chǎn)生假陽性的結(jié)果。所以像吸頭、PCR相關(guān)的耗材通常都是無核酸酶的。
關(guān)于熱原和內(nèi)毒素的檢測
下面簡單介紹下藥典中對熱原和內(nèi)毒素檢測的內(nèi)容。
1
熱原檢測
中國藥典1142通則中描述了使用家兔法進行熱原檢測。使用健康合格的家兔,將一定劑量的供試品,靜脈注入家兔體內(nèi),在規(guī)定時間內(nèi),觀察家兔體溫升高的
情況。與供試品接觸的試驗用器皿應(yīng)無菌、無熱原。去除熱原通常釆用干熱滅菌法(250℃、30分鐘以上),也可用其他適宜的方法。如果受試的家兔在一定
時間內(nèi)的體溫升高到一定標準,則認為供試品的熱原檢查不符合規(guī)定。
2
內(nèi)毒素檢測
內(nèi)毒素檢測以前國際上都使用鱟試劑法進行檢測。具體方法有凝膠法和光度測定法,鱟試劑可以與細菌內(nèi)毒素發(fā)生凝集反應(yīng),產(chǎn)生凝膠或者發(fā)生濁度變化,通過測
定這種變化測定內(nèi)毒素含量。鱟試劑是從海洋節(jié)肢動物鱟的血液中提取制成的一種試劑,因此鱟在世界范圍內(nèi)遭到大量捕殺,在我國也成為了國家二級保護動物。
目前FDA已經(jīng)批準了重組C因子法,替代了鱟試劑。我國藥典的指導(dǎo)原則中也已提到該法。
如何進行選擇
其實了解了這幾個概念之后如何進行選擇也就不難了。主要還是根據(jù)自己的需求來選擇。通常無酶和熱原的耗材較為常見,無內(nèi)毒素的產(chǎn)品相對較少。如果實驗
本身對于這些沒有較高要求,其實可以選用普通耗材,舉個例子在做離心的時候,如果是離心細胞或者相關(guān)成分最好選用無酶和熱原的離心管,而如果只是普通
的液體離心實際上普通離心管即可。
另外這也是很多使用者會產(chǎn)生的問題,就是在向一些商家采購離心管的時候會問該離心管能否重復(fù)使用,這個問題實際上要因情況而議,因為離心管在使用過一
次之后就已經(jīng)在一定程度上被污染了,而且即使進行壓力蒸汽滅菌也無法完全消除這些污染,因此再次使用的話需要看使用者自己對實驗的需求了。
歸根結(jié)底,所有的產(chǎn)品都是為實驗者和實驗服務(wù),不能因為產(chǎn)品而影響自己的實驗,而是需要根據(jù)自己的實驗去選擇合適的和產(chǎn)品即可。
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